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    EMSA检测雷竞技app安卓版

    上传日期:2017-11-29  阅读次数:3358



    EMSA检测雷竞技app安卓版

    概述

    凝胶迁移或电泳迁移率雷竞技app官方版(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争雷竞技app官方版中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

    雷竞技app安卓版项目:

    考察蛋白是否和特定序列结合或者序列是否和蛋白结合。

      

    雷竞技app安卓版内容:

    1、从动物细胞、人或动物组织等样品中提取核蛋白或者重组表达蛋白与核酸混合物

    2、用BCA进行蛋白定量

    3、EMSA检测

    (1) 核蛋白混合物与探针等进行反应

    (2) 预电泳及电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

    (3) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

    (4) 紫外交联:交联波长254nm(Cross Linking)

    (5) 杂交孵育:与Biotin结合的SA-HRP孵育

     

    客户提供:受试样品

     

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